TB-Clin-Divers Réponse immune de l’hôte associée aux facteurs bactériens de predisposition à la dissémination de Mycobacterium tuberculosis et à la diversité de la forme clinique de la tuberculose

Contexte et justification

Au cours de l’infection, Mycobacterium tuberculosis (Mtb) peut disséminer hors des poumons et atteindre d’autres organes conduisant à une TB extrapulmonaire (EPTB). La difficulté du diagnostic bactériologique de l’EPTB fait que celui-ci repose principalement sur des critères cliniques et paracliniques. Le délai entre le diagnostic et le début du traitement est associé à une forte mortalité. Dans la population tuberculeuse, l’EPTB est observée chez environ 20% des sujets immunocompétents et 50% des sujets immunodéprimés.. Dans une étude sur des macrophages infectés par Mtb et des observations de patients atteints de TB, la production de facteurs de l’angiogenèse semble liée avec la dissémination des bactéries dans d’autres organes. De plus, la réponse immune l’hôte humain varie selon le génotype des souches de Mtb et pourrait influencer la présentation clinique de la TB. Une meilleure compréhension des facteurs bactériens sur la réponse immunitaire de l’hôte en relation avec les formes cliniques de TB permettrait de mieux comprendre les mécanismes de l’EPTB et de mettre au point des outils de diagnostic pour la  prise en charge rapide des patients tuberculeux.

Objectifs

Rechercher des facteurs bactériens associés aux EPTB. Plus spécifiquement, il s’agira d’étudier les variations de la production de cytokines de macrophages humains infectés par des bactéries issues de diverses formes cliniques de TB et chez les patients avec différentes formes cliniques de TB.

Méthodes

Des souches issues de sites cliniques EPTB et des souches pulmonaires (PTB), avec le même spoligotype et de patients appariés  ont été sélectionnées pour l’infection in vitro de macrophages différenciés de lignées cellulaires THP1. La capacité microbicide des macrophages ainsi que les cytokines (IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-10, VEGF) secrétées par les macrophages infectés ont été mesurées et comparées selon l’origine clinique des souches infectantes. Un dosage des cytokines dans le sang de patients TB a été réalisé.

Résultats (état d’avancement)

Les infections in vitro ont été réalisées avec 10 souches cliniques EPTB et 10 souches PTB avec les mêmes spoligotypes « East African Indian_MDG ». Des différences statistiques de production de cytokines entre souches EPTB et PTB ont été observées indépendamment donc de la variabilité génétique de l’hôte. L’accord du comité d’éthique à Madagascar pour un amendement permettant le recrutement de patients tuberculeux avec diverses formes cliniques pour valider les observations in vitro a été obtenu en 2016. 40 patients suspects d’EPTB ont été recrutés, dont 10 ont été confirmés par la culture, ainsi que 15 patients PTB confirmés. Le recrutement de ces patients est terminé et les analyses statisiques entamées une fois les résultats des cultures reçues afin de comparer le taux de cytokine entre PTB, EPTB confirmés et EPTB non confirmés pour corroborer les observations in vitro. Le génome complet des souches présentant des différences phénotypiques chez l’hôte seront séquencées en 2017.

Impacts

La mise en évidence des facteurs bactériens associés aux formes cliniques de la TB permettra d’améliorer la compréhension des mécanismes de dissémination du pathogène, l’identification de cibles thérapeutiques et la lutte contre la propagation de la maladie.